jurnal praktikum kimia organik I Kromatografi lapis tipis dan kolom

JURNALPRAKTIKUM
KIMIA ORGANIK I

 

NAMA : DIANA SARI

NIM : A1C118096

DOSEN PENGAMPU

Dr. Drs. SYAMSURIZAL, M.Si.

PROGRAM STUDI PENDIDIKAN KIMIA

JURUSAN PENDIDIKAN MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN 

UNIVERSITAS JAMBI

 2020

I. Judul : Kromatografi Lapis Tipis dan Keton

II. Hari/Tanggal : Rabu, 29 April 2020

III.Tujuan : Adapun tujuan dilakukannya percobaan ini ialah,

1. Dapat mengetahui teknik-teknik dasar kromatografi lapis tipis dan kolom.
2. Dapat membuat pelat kromatografi lapis tipis dan kolom kromatografi. 
3. Dapat memisahkan suatu senyawa dari campurannya dengan kromatografi lapis tipis dan memurnikannya dengan kolom. 
4. Dapat memisahkan pigmen tumbuhan dengan cara kromatografi kolom.

IV. Landasan Teori

    Teknik yang biasanya digunakan untuk memisahkan zat yang berdasarkan komponen penyusunnya dan tiap kompenen tersebut dapat dianalisis yaitu kromatografi. Dalam kromatografi memiliki prinsip yang mana komponen penyusunnya terdapat pada perbedaan afinitas yang dimiliki dari tiap jenis analit kepada fasa gerak dan fasa diam, yang nantinya tiap penyusun komponennya akan terpisah antara satu sama lain (http://syamsurizal.staff.unja.ac.id/2019/04/10/325teknik-pemisahan-dengan-khromatografi/).

    Menurut Tim Kimia organik I (2020), teknik pemisahan dalam sekala preparatif dalam miligram hingga puluhan gram yakni kromatografi kolom. Pemisahan ini dilakukkan dengan menggunakan kolom yang suah diisi penjerap. Yang nantinya zat yang campurannya akan dipisahkan dimasukkan pada bagian atas penjerap, sehingga semuanya terjerap. Setiap zat akan turun dengan kecepatan yang berbeda-beda sesuai dengan afinitas terhadap penjerapnya.

    Untuk melakukan teknik ini perlu banyak bahan yang digunakan yang dipakai sebagai fasa gerak dan fasa diamnya, tetapi tergantung dari ukuran kolom yang dipakai. Tetapi hal ini memiliki kekurangan, yang mana perlu dilakukkan dalam waktu yang lama. Penyebab waktu yang dibutuhkan lama yaitu dikarenakan pemisahan hanya mengandalkan gaya gravitasi yang digunakan dalam proses alirnya (Hendayana, 2006).

    Menurut Soebagio (2009),  kromatografi lapis tipis merupakan teknik pemisahan berdasarkan pada adsorpsi. Tekanan yang dimiliki kromatografi kertas dengan kromatografi lapis tipis sama, yang mana elusinya relatif lebih pendek dan juga bisa dipakai untuk analisis kuantitatif. Teknik ini memiliki keunggulan yaitu menggunakan pelarut yang sedikit.

V. Alat dan Bahan

5.1. Alat

1. Pelat Kaca Kecil
2. Oven
3.  Gelas Piala
4. Batang Pengaduk 
5. Cawan Petri 
6. Tabung Reaksi
7.  Pipa Gelas Kapiler
8.  Bejana Pengembang
9. Lumpang
10.  Rotary Evaporator
11.  Pipet Tetes
12.  Glass Wool   

5.2 Bahan

1. Metanol
2.  Silika Gel
3.  Aquades
4.  Asam Asetat
5.  Eter
6.  Benzena
7.  Kafein
8.  Kristal Iod
9.  Petrolium Eter
10.  Kristal Na-sulfat Anhidrat
11.  Selulosa
12.  Kalsium Karbonat
13.  Sukrosa
14.  Aseton
15.  Kertas Saring 

VI. Prosedur Kerja

6.1          Kromatologi Lapis Tipis

a.             Penyiapan Pelat

1.    Dibersihkan pelat kaca kecil dengan air, lalu dengan methanol, lap dengan kertas atau kain kering kemudian dikeringkan di dalam oven pengering.

2.    Disusun 5 pelat diatas sebuah kaca besar, kemudian direkatkan kedua sisi deretan pelat kecil tadi dengan pita selotip

3.    Disiapkan suspense silica gel dengan mencampurkan 5 gram bahan dan 10 ml methanol atau air suling dalam gelas piala tertutup, disebarkan suspense di atas pelat dan diratakan suspense keseluruhan permukaan kaca dengan bantuan batang pengaduk. Dikeringkan pelat dalam oven 120 derajat celcius sekitar 10 menit. 

b.             Penyiapan Bejana

1.    Dibuat larutan pengembang dengan komposisi methanol, asam asetat, eter, benzene (0,10 ; 1 ; 3 ; 5,9)ml dalam gelas piala 100 ml. Dilapisi dinding dalam gelas piala dengan kertas saring. Ditutup gelas piala tersebut dengan cawan petri agar lingkungan dalam bejana jenuh dengan pelarut pengembang. 

c.              Penyiapan Contoh

1.    Digerus dua buah tablet yang mengandung kafein dan diekstaksi dengan 5 ml methanol

2.    Dilarutkan 50 mg kafein standar dalam 1 ml methanol dalam sebuah tabung reaksi kecil.

3.    Cairan ekstraksi obat maupun larutan susentik masing-masing diambil dengan menggunakan pipa gelas kapiler, lalu dibubuhkan di atas pelat TLC kecil dengan jarak 1cm satu sama lain dan 1 cm dari tepi pelat kaca. Dikeringkan noda sampel dan standar dengan dryer(tutup), lalu dibubuhkan 3-5 kali dengan setiap kali dikering. Diusahakan membentuk noda pekat yang kecil. 

d.             Pengembangan

1.   Dimasukkan pelat dalam bejana pengembang. Dijaga agar jangan noda senyawa tidak terendam dalam larutan pengembang. Dibiarkan proses ini berlangung sampai garis dapat pelarut mencapai sekitar 1 cm dari tepi atas pelat.

2.    Diangkat pelat dari bejana, ditandai garis depan pelarut dengan pensil lunak lalu dikeringkan.

3.   Dimasukkan pelat kedalam gelas piala 250 ml yang berisi butiran Kristal iod, dan ditunggu sampai pelat  menampakkan noda

4.    Dianggkat pelat dan ditandai segera lingkaran noda dengan pensil

    5.    Dihitung dan dibandingkan semua Rf yang diperoleh.

6.1          Kromatologi Kolom

a.             Penyiapan sampel

1.    Kira-kira sepuluh lembar contoh daun dilumatkan dengan lumping dan direndam selama 1 jam dengan campuran 90 ml petroleum eter, 10 ml benzene dan 30 ml methanol. Disaring lalu diekstraksi dengan 4 kali 50 ml. dipisahkan lapisan organik. dikeringkan lapisan ini dengan Kristal Na-sulfat anhidrat. Kemudian disaring lagi. Dipekatkan lapisan organik dengan buntuan rotavor sampai volume cairan tinggal beberapa milliliter.

b.             Penyiapan Kolom

1.    Disipakan kolom kromatografi dengan sebuah pipet tetes. Disumbat bagaian bawah dengan glass wool, dimasukkan suspense selulosa. Sehingga timbunan selulosa dalam kolom mencapai 3-4 cm. dimasukkan suspense selulosa membentuk ketinggian 3-4 cm. selama pengemasan kolom, pelarut harus terus-menerus diberikan, jangan sampai penjerap menjadi kering dan uadar masuk. Letakkan guntinga kertas saring diantara dan diatas timbunan penjerap untuk menjaga agar permukaannya tida terganggu oleh aliran satu sampel yang akan dimasukkan.

c.              Kromatografi

1. Setelah permukaan pelarut turun mendekati penjerap, masukkan larutan sampel setinggi 1 cm. jika permukaan sampel telah mendekati permukaan penjerap, segara bilas bagian dalam kolom dengan pelarut campuran PE;aseton (6;1). Pelarut harus terus-menerut diteteskan ke dalam kolom. Pemisahan yang terjadi terlihat dari sejumlah pita berwarna. Pita orange bergerak paling cepat, disusul pita hijau, pita kuning dan hijau. Tetesan yang keluar dari kolom ditampung dengan beberapa tabung reaksi bersih dan dapat dipisahkan berdasarkan warnanya. Dihentikan pemberian pelarut bila semua warna telah keluarr dari kolom. Apabila pemisahan berjalan dengan baik akan tampak pita hijau dari klorofil b pada sukrosa, klorofl a berwarna hijau bru pada sukrosa atau CaCO₂. Pita kuning dari xantofil pada CaCO₃ dan pita jingga dari karoten pada selulosa. 

Link vidio

kromatografi kolom : https://youtu.be/i3CSlcD2yQo
kromatografi lapis tipis : https://youtu.be/OZKuZ_w2Fg0

Permasalahan

1. pada vidio pertama, kromatografi kolom dilakukkan. ada beberapa bahan yang digunakan, salah satunya pewarna makanan. Apa yang menyebabkan pewarna makanan tersebut jatuh lebih dulu ?
2. Mengapa pada vidio kedua, kromatografi lapis tipis dilakukkan dengan menutup cumber yang digunakan?
3. Pada vidio kedua, eluen yang digunakan dijenuhkan terlebih dahulu. Apa yang terjadi jika eluen yang digunakan tidak jenuh dan apa tujuan dari penjenuhan tersebut?